Né le 19 juin 1972 à Rueil-Malmaison, il démarre dans la vie active en tant que serrurier, avant de voir ses talents de comique se révéler à l'armée. Il décide alors de monter à Paris, et commence à se produire dans des bars. Au café-théâtre Le Carré Blanc, il rencontre Bruno Salomone, Eric Collado, Emmanuel Joucla et Eric Massot, avec lesquels il formera la troupe comique des Nous C Nous. C'est également dans cette salle qu'il campe pour la première fois le personnage de Brice de Nice, qu'il reprendra plus tard dans des sketches diffusés sur M6 et sur France 2 - et qui sera appelé à devenir culte ! Peu après, la notoriété de Jean Dujardin explose grâce à la série de France 2, "Un gars, une fille", dans laquelle il joue de 1999 à 2003, incarnant le sympathique Loulou, face à Alexandra Lamy en pétillante Chouchou.
Le cinéma lui fait alors de l'il, et l'acteur apparaît dans des comédies comme "Ah ! si j'étais riche" de Michel Munz et Gérard Bitton, ou "Toutes les filles sont folles" de Pascale Pouzadoux. Mais c'est, en 2004, ses prestations dans la comédie "Mariages !" de Valérie Guignabodet, et dans le thriller "Le Convoyeur" de Nicolas Boukhrief, qui l'imposent comme un acteur de cinéma à part entière. Ce statut se voit encore renforcé l'année suivante par le succès phénoménal de "Brice de Nice", de James Huth, un film inspiré de son héros surfeur et déjanté qui avait déjà fait rire des milliers de Français.
Friand d'apparitions comiques en tout genre (comme dans "Les Dalton" avec Eric et Ramzy), il se prête aussi au jeu de la comédie romantique dans "L'Amour aux trousses" de Philippe de Chauveron, avec Pascal Elbé et Caterina Murino, et "Il ne faut jurer de rien !" d'Eric Civanyan, avec Gérard Jugnot et Mélanie Doutey, sur une trame empruntée à Alfred de Musset.
En 2006, Jean Dujardin hérite d'un nouveau rôle culte : celui de Hubert Bonnisseur de la Bath, alias OSS 117, dans "Le Caire nid d'espions", un pastiche des polars des années 50 et 60, mis en boîte par Michel Hazanavicius. Cet espion bête comme chou, mais qui toujours fait mouche, évolue dans des décors de carte postale, se bat contre des méchants de pacotille, et séduit des filles sublimes. Plébiscité par le public, il est de retour en 2009 pour une nouvelle aventure, "Rio ne répond plus", toujours aussi haute en couleurs et toujours aussi drôle.
Entre-temps, Jean Dujardin a changé de registre, tout comme il l'avait déjà fait avec "Le Convoyeur", et incarne, dans le polar "Contre-enquête" de Franck Mancuso, un policier endeuillé par la mort de sa fille. Parallèlement, il campe le héros du "99 francs" réalisé par Jan Kounen, d'après le roman éponyme de Frédéric Beigbeder : une satire du petit monde de la pub, dans laquelle il apparaît quasi-méconnaissable en sosie du romancier, cheveux mi-longs et lunettes plastique. En 2008, il rejoint Jean Reno et Alice Taglioni sur le plateau de la comédie policière "Cash" d'Eric Besnard, et, l'année suivante, fait une apparition en forme d'hommage à Jean-Paul Belmondo dans "Un homme et son chien", dans lequel la légende du septième art, quelque peu à bout de souffle, raconte une de ses dernières grandes histoires devant la caméra de Francis Huster.
2009 est aussi l'année d'un nouveau grand rôle : celui de Lucky Luke, dans l'adaptation de la bande dessinée signée Morris et Goscinny. Mises en images par James Huth, ces aventures sur le cow-boy solitaire qui tire plus vite que son ombre entraînent l'acteur au Far West, avec Alexandra Lamy en Belle et Michaël Youn en Billy The Kid.